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抗体制备相关弗氏免疫佐剂套装(加强型)产品使用说明书
在您使用本产品前请认真阅读说明书,这对您顺利完成实验很有帮助。
产品货号:8006
产品名称:弗氏免疫佐剂套装(加强型)(4瓶完全佐剂+12瓶不完全佐剂/套)
产品外观:淡黄色透明粘稠液体(其中完全佐剂肉眼可见细碎的有免疫增强作用的颗粒物)。
防腐成分:不含防腐剂。
储存方法:请避光存放在4℃。(一般建议2-8℃保存即可。)
有效期限:有效期三年。
注意事项:虽然本产品很稳定但您还是要尽可能避免阳光直射带来的危害;另外抗原如果含有甘油或者尿素以及有机溶剂时会降低乳化效率,甚至乳化失败。
使用方法:实验表明较好的使用比例是50%(50%-30%乳化后粘度逐步增加,抗原释放速度逐步加快)。乳化建议使用以下3种方法去操作:
1、搅拌乳化:抗原先加入乳化管,随后加入等量佐剂,用搅拌器自上而下慢慢搅拌佐剂入抗原层,慢慢下移这时会发现混合液很快乳白越来越粘,一般5分钟内就完成了。(注意!切忌乳化搅拌器搅拌头直接插入管底那样乳化时间就变长。)
2、推打乳化:首先将抗原装入注射器A,将等量佐剂装入注射器B。推打前两个注射器其中一个吸进去1/2抗原或1/2佐剂体积的空气,然后将两个注射器用连接器连接,通过来回往复推打一般5分钟内就会完成乳化。(注意!没有留空气直接推打的话,由于混合物无法更好的翻滚,会增加乳化难度和时间。)
3、超声波乳化:在合适大小的离心管中加入佐剂和等体积抗原,离心管盖上盖子后先手动摇几下再进行超声操作,因为这样可以避免超声探头浸没在不含水的上端佐剂里,造成削减超声强度,给乳化带来失败;摇晃后上端含水超声有利于传播。一般超声乳化也是在5分钟内就会完成。
!!!注意乳化后的鉴定,是否乳化彻底对免疫效果有较大影响,因此在此给您鉴别乳化是否完成的方法:1、乳化后的抗原放入小台式离心机离心8000RPM,10分钟后取出观察,离心管底部没有水分管体通体乳白,上边有时候会有一点点透明佐剂,这是佐剂足量的缘故,不说明和反映乳化效果。此时可认为乳化完成。2、滴水法,将乳化后的抗原距离水面高度10-15厘米内滴入水中(水温冷水或室温,不要用热水),一般首滴由于乳化微粒外面是油膜,油分子是互相排斥的所以首滴会慢慢散开(超高粘度的佐剂首滴就不会散,但是制备多抗效果一般要差一些,不利于免疫细胞吞噬),此时滴入第二滴第三滴一般就会是一个圆滴不会再散开,这种情况认为乳化已经合格,
使用范围:特别适合兔子、山羊、豚鼠等多克隆抗血清的制备,也可用于小鼠融合前的免疫;禁止用于人类或其它用途,超范围使用产生的法律后果需要自行承担。
特别提示:如果您在实验过程中遇到任何困难,请及时联系我们技术团队获取支持。
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